生物顯微鏡的使用方法

　　在日常學(xué)習(xí)、工作和生活中，說(shuō)到顯微鏡，大家肯定都不陌生吧，以下是小編幫大家整理的生物顯微鏡的使用方法，歡迎大家分享。

　　一、生物顯微鏡的使用

　�。ㄒ唬┦褂铆h(huán)境與習(xí)慣

　　1、使用環(huán)境

　　顯微鏡的工作場(chǎng)所應(yīng)當(dāng)清潔、干燥、無(wú)震動(dòng)、無(wú)腐蝕性氣體存在。

　　2、工作習(xí)慣

　�。�1）臺(tái)面和凳子的高度要適當(dāng)。

　�。ǎ玻╃R檢時(shí)，即便用單目顯微鏡，也須兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。如一只眼睜，一只眼閉，眼睛容易疲勞，無(wú)法久看。工作時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，可兩眼輪流觀察。

　　（二）使用前的準(zhǔn)備

　　1、光學(xué)系統(tǒng)的安裝

　　對(duì)新購(gòu)或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統(tǒng)的顯微鏡，使用前必須先將顯微鏡安裝起來(lái)。安裝時(shí)，為了防止向下掉灰塵，應(yīng)按照先上后下的順序，即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來(lái)安裝。圖10-3-1為顯微鏡的安裝圖。箭頭所示為光學(xué)元件的安裝位置。

　　安裝物鏡時(shí)，應(yīng)先將鏡筒升高或載波物臺(tái)下降，使轉(zhuǎn)換器與載物臺(tái)之間保持一定的距離。然后，握往物鏡，把它放入轉(zhuǎn)換器的螺絲口處，先略向反時(shí)針?lè)较蛐�轉(zhuǎn)，待物鏡配上絲紋后，再按順時(shí)針?lè)较蛐�入，旋至中等程度松緊即可。安裝物鏡時(shí)，應(yīng)根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)，從小到大順時(shí)針安裝。轉(zhuǎn)換物鏡時(shí)，不要用手推著物鏡旋轉(zhuǎn)，那樣會(huì)使物鏡的光軸歪斜。最好用手捏著轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動(dòng)盤(pán)旋轉(zhuǎn)，或用手扶著與物鏡轉(zhuǎn)換器銜接處的滾花外圓旋轉(zhuǎn)。

　　目鏡和物鏡裝好后，再將聚光鏡插入載物臺(tái)下面的聚光器支架內(nèi)。插入的高度應(yīng)使聚光器升至最高時(shí)，聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺(tái)的平面，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后，將聚光器的固定螺絲旋緊。對(duì)非電光源的顯微鏡來(lái)說(shuō)，最后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內(nèi)。

　　2、校正光軸

　　校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點(diǎn)重合在一條直線上。所以又叫做合軸調(diào)節(jié)或中心調(diào)節(jié)。如果光軸歪斜，會(huì)使像差增大，分辨率和清晰度都要下降。

　　檢查方法是將可變光欄開(kāi)至最大，把低倍物鏡旋入光軸，降低鏡筒，使物鏡與載物臺(tái)之間的距離小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。不放標(biāo)本，調(diào)節(jié)反射鏡的角度，使視場(chǎng)最亮；或調(diào)節(jié)光源燈的亮度，使視場(chǎng)明暗合適。

　　然后，拔掉目鏡，直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開(kāi)數(shù)次，當(dāng)光欄關(guān)至最小時(shí)，光欄的像（此時(shí)只有一點(diǎn)點(diǎn)）應(yīng)正好落在物鏡通光孔的中心。當(dāng)光欄開(kāi)大到一定程度時(shí)，光欄孔的像應(yīng)正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個(gè)條件，說(shuō)明它們“合軸”。否則，就需要調(diào)整。

　　目鏡和物鏡都是固定的，無(wú)法進(jìn)行調(diào)整。合軸調(diào)節(jié)主要是調(diào)整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個(gè)光軸校正螺絲，調(diào)節(jié)這兩個(gè)螺絲，即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個(gè)相隔120°的螺絲支持住，其中一個(gè)裝有彈簧，可以伸縮；另外兩個(gè)螺絲，可以旋動(dòng)。調(diào)整這兩個(gè)螺絲，便可合軸。

　　顯微鏡的光軸校正好后，如果沒(méi)有拆下聚光器或其它特殊原因，不必經(jīng)常校正。

　　3、準(zhǔn)備好標(biāo)本

　　準(zhǔn)備好高質(zhì)量的標(biāo)本備用。

　　（三）反射鏡、聚光器的使用方法和對(duì)光方法

　　1、調(diào)光

　　對(duì)采用反射鏡的的顯微鏡，一般都使用平面反射鏡去反射太陽(yáng)的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時(shí)，才使用凹面反射鏡。

　　采用電光源的顯微鏡，將光亮調(diào)合適即行。

　　2、聚光器的用法

　�。�1）聚光器高度的調(diào)節(jié) 一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下，其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時(shí)，由于放大率大，鏡像亮度小，需要較強(qiáng)的照明。因此，應(yīng)把聚光器升至最高，以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面上。但在使用低倍物鏡時(shí)，可將聚光器適當(dāng)下降。

　�。ǎ玻┛勺児鈾诘挠梅� 可變光欄起兩個(gè)作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑。在這兩個(gè)作用中，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用，從原則上說(shuō)，聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則，分辨率或清晰度會(huì)受影響。

　　3、對(duì)光方法

　　對(duì)電光源顯微鏡來(lái)說(shuō)，使用時(shí)，只要將光調(diào)節(jié)在合適的亮度即行。不需要進(jìn)行對(duì)光。但對(duì)使用自然光的低檔顯微鏡來(lái)說(shuō)，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線。因此，鏡檢之前應(yīng)先對(duì)光。對(duì)光時(shí)，將低倍鏡旋入光軸，聚光器適當(dāng)升高，可變光欄開(kāi)至最大。然后，從目鏡中觀察，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡，直至視場(chǎng)最明亮、清晰為止。如果利用自然光，則盡量躲避窗框和窗外樹(shù)枝的干擾。

　�。ㄋ模┪镧R的正確調(diào)焦

　　對(duì)光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后，升高鏡筒或降低載物臺(tái)，將標(biāo)本玻片夾在移動(dòng)器即標(biāo)本夾上，并將欲檢查的部分移至載物臺(tái)通光孔的中央，然后開(kāi)始調(diào)焦。

　　無(wú)論作何種檢查，均應(yīng)從低倍鏡開(kāi)始。調(diào)焦時(shí)，先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離（５mm以下）。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上，可從側(cè)面窺視。然后，一邊從目鏡中觀察視野，一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升，待初見(jiàn)物像后，改用微動(dòng)手輪作精細(xì)調(diào)焦，直至物像最清晰為至。低倍物鏡的視場(chǎng)大，有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動(dòng)器或縱、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo)。如有必要，可將尋得的目標(biāo)移至視場(chǎng)的中心，為高倍鏡觀察作好準(zhǔn)備。

　　從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時(shí)，如果物鏡是顯微鏡的原配，所用的載玻片、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn)，一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”。即轉(zhuǎn)換后，只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕，即可看到清晰的圖像。但油鏡不強(qiáng)求齊焦，最好先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換，最后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦。

　　使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標(biāo)本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油中不應(yīng)有氣泡。如有，可用小木簽除去），再將標(biāo)本玻片放回原處，把聚光器升高，使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣，就完成了聚光鏡的油浸。接著，在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側(cè)面窺視，利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降，直至油鏡的前透鏡浸沒(méi)在香柏油中（但尚未接觸玻片），這樣，又完成了物鏡的油浸。然后，一邊從目鏡中觀察，一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯(cuò)了方向，壓碎蓋玻片），直至視野中出現(xiàn)最清晰的物像為止。

　　聚光鏡的油浸，還可以采用另一種滴油方法：即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上，而是把載玻片翻過(guò)來(lái)，將油滴在載玻片的底面上，然后再翻過(guò)去，對(duì)準(zhǔn)放置于聚光器上面，再使聚光器上升，來(lái)完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手，但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來(lái)涂抹香柏油，這種方法容易劃傷鏡片，不宜采用。

　　在使用油鏡時(shí)，允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì)，但這會(huì)犧牲物鏡的分辨率。

　　如用油鏡觀察后，如又需要轉(zhuǎn)回高倍物鏡觀察，應(yīng)將蓋玻片上的油擦去，以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦，只要把光欄適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可。

　　油鏡使用完畢后，要及時(shí)將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1～２次，把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次，最后用擦鏡紙擦干凈即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙復(fù)蓋在玻片上，在紙上滴上一滴二甲苯，趁濕將紙條平拖著往外拉，連續(xù)幾次即可擦干凈。

　　最后指出：在整個(gè)調(diào)焦過(guò)程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦），每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行。否則，物像會(huì)一閃而過(guò)，找不到觀察的目標(biāo)。

　　生物顯微鏡的使用步驟1

　　(1)顯微鏡的取送：

　　①右手握鏡臂;

　�、谧笫滞戌R座;

　　③置于胸前。

　　(2)顯微鏡的旋轉(zhuǎn)：

　�、夔R筒朝前，鏡臂朝后;

　�、谥糜谟^察者座位前的桌子上，偏向身體左側(cè)，便于左眼向目鏡內(nèi)觀察;

　�、壑糜谧雷觾�(nèi)側(cè)，距桌沿5cm左右。

　　(3)對(duì)光：

　�、俎D(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔;

　�、谟檬种皋D(zhuǎn)動(dòng)遮光器(或片狀光圈)，使最大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔，左眼向目鏡內(nèi)注視，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使其朝向光源，使視野內(nèi)亮度均勻合適。

　　(4)低倍物鏡的使用：

　　①用手轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐下降，同時(shí)兩眼從側(cè)面注視物鏡鏡頭，當(dāng)物鏡鏡頭與載物臺(tái)的'玻片相距2～3mm時(shí)停止。

　�、谟米笱巯蚰跨R內(nèi)注視(注意右眼應(yīng)該同時(shí)睜著)，并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，直到看清物象為止。如果不清楚，可調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，至清楚為止。

　　(5)高倍物鏡的使用：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀察的物象，并調(diào)到視野的正中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后，視野內(nèi)亮度變暗，因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面，然后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。觀看的物體數(shù)目變少，但是體積變大。

　　(6)反光鏡的使用：反光鏡通常與遮光器(或光圈)配合使用，以調(diào)節(jié)視野內(nèi)的亮度。反光鏡有*面和凹面。對(duì)光時(shí)，如果視野光線太強(qiáng)，則使用反光鏡的*面，如果光線仍舊太強(qiáng)，則同時(shí)使用較小的光圈;反之，如果視野內(nèi)光線較弱，則使用較大的光圈或使用反光鏡的凹面。

　　知識(shí)點(diǎn)撥：

　　(1)進(jìn)行顯微鏡對(duì)光時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡或是光圈，使視野明亮，便于使用高倍鏡觀察。

　　(2)制作臨時(shí)裝片時(shí)，如果觀察的是植物細(xì)胞，在載玻片上滴加清水;如果觀察人的口腔上皮細(xì)胞，需要滴加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液,高二。

　　(3)無(wú)論選取動(dòng)物組織細(xì)胞還是植物組織細(xì)胞，一定要量少，并且要在載玻片上將觀察材料展開(kāi)，以便于觀察。

　　(4)觀察時(shí)，要遵循先在低倍鏡下觀察清楚，將物像移至視野中央，再轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察的順序。在使用高倍鏡進(jìn)行觀察時(shí)，不能轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。

　　生物顯微鏡的使用方法及步驟1

　　右手握住鏡臂，左手托住鏡座。

　　把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。

　　二、對(duì)光

　　轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持2厘米的距離)。

　　把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開(kāi)，便于以后同時(shí)畫(huà)圖)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使光線通過(guò)通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過(guò)目鏡，可以看到白亮的視野。

　　三、觀察

　　把所要觀察的玻片標(biāo)本(也可以用印有“6”字的薄紙片制成)放在載物臺(tái)上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。

　　轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標(biāo)本)。

　　左眼向目鏡內(nèi)看，同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

　　高倍物鏡的使用：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀察的物象，并調(diào)到視野的正中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后，視野內(nèi)亮度變暗，因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面，然后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。觀看的物體數(shù)目變少，但是體積變大。

　　四、整理

　　實(shí)驗(yàn)完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，把兩個(gè)物鏡偏到兩旁，并將鏡筒緩緩下降到zui低處，反光鏡豎直放置。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。

　　《注意事項(xiàng)》：

　　1、嚴(yán)忌單手提取顯微鏡。

　　2、若須移動(dòng)顯微鏡，務(wù)必將顯微鏡提起再放至適當(dāng)位置，嚴(yán)忌推動(dòng)顯微鏡(推動(dòng)時(shí)造成的震動(dòng)可能會(huì)導(dǎo)致顯微鏡內(nèi)部零件的松動(dòng)，切記!!)，使用顯微鏡請(qǐng)務(wù)必小心輕放。

　　3、使用顯微鏡時(shí)坐椅的高度應(yīng)適當(dāng)，觀察時(shí)更應(yīng)習(xí)慣兩眼同時(shí)觀察，且光圈及光源亮度皆應(yīng)適當(dāng)，否則長(zhǎng)時(shí)間觀察時(shí)極易感覺(jué)疲勞。

　　4、轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤(pán)時(shí)務(wù)必將載物臺(tái)降至zui低點(diǎn)，以免因操作不當(dāng)而刮傷接目鏡之鏡頭。

　　5、標(biāo)本染色或其它任何操作皆應(yīng)將玻片取下，操作完成后再放回載物臺(tái)觀察，切勿在載物臺(tái)上操作，以免染劑或其它液體流入顯微鏡內(nèi)部或傷及鏡頭。

　　6、觀察完一種材料，欲更換另一種材料時(shí)，務(wù)必將載物臺(tái)下降至zui低點(diǎn)，換好玻片后再依標(biāo)準(zhǔn)程序重新對(duì)焦，切勿直接抽換標(biāo)本，以免刮傷鏡頭或玻片標(biāo)本。

　　7、用畢顯微鏡應(yīng)將載物臺(tái)下降至zui低點(diǎn)，并將低倍鏡對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)中央圓孔處，將電源線卷好，蓋上防塵罩，并收入存放柜中。

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