(推薦)生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告
在不斷進(jìn)步的時(shí)代,報(bào)告的用途越來越大,不同種類的報(bào)告具有不同的用途。你所見過的報(bào)告是什么樣的呢?下面是小編整理的生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望對(duì)大家有所幫助。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告1
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
(一)掌握一般培養(yǎng)基的制備原理及要求,掌握培養(yǎng)基酸堿度的測(cè)定,熟悉一
般培養(yǎng)基的制備過程和各種器皿滅菌方法。
。ǘ┱莆占(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法,掌握細(xì)菌抹片的制備方法和革蘭
氏染色法及油鏡的使用方法,并認(rèn)識(shí)革蘭氏染色的反應(yīng)特性。
。ㄈ┱莆諏W(xué)習(xí)用微生物學(xué)原理診斷疾病的一般方法及步驟。
二、實(shí)驗(yàn)用品
。ㄒ唬┢鞑
量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號(hào)筆、接種環(huán)、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養(yǎng)箱、水浴培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡
。ǘ┰噭┘安牧
肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結(jié)晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內(nèi)臟
三、實(shí)驗(yàn)步驟
。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基的制備
(所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min,傾注平板在無菌操作臺(tái)內(nèi)完成,并放在無菌操作臺(tái)內(nèi))
1、麥康凱培養(yǎng)基
(1)組成:蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖
10g、0.01%結(jié)晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml
。2)方法:將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中,調(diào)節(jié)
ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中,并加入乳糖,加熱熔化。將兩
液混合,分裝于燒瓶?jī)?nèi),用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌
15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí),加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液,搖勻后
傾注平板。
注:結(jié)晶紫和中性紅水溶液配好后需經(jīng)高壓滅菌。
2、血清平板
。1)組成:營(yíng)養(yǎng)瓊脂、牛血清
。2)方法:將滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂加熱熔化,冷卻至45~50℃時(shí),加入牛血清,并
混勻,傾注平板。
注:不得將牛血清一并加入后再滅菌。
3、lb培養(yǎng)基
。1)組成:胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g
(2)方法:在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉,調(diào)節(jié)ph至7.4,加熱熔化,分裝于瓶中,用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí),傾注平板。
4、液體培養(yǎng)基(在lb培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,裝入大試劑瓶中,不加瓊脂,不分裝)
(二)病料取材
在病豬死亡后,首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在,未發(fā)現(xiàn),則立即用消毒的器械對(duì)其進(jìn)行生理解剖,觀察其病理特征現(xiàn)象,取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物,并注意組織的完整性,用儲(chǔ)物袋密封保存。
。ㄈ┘(xì)菌粗培養(yǎng)
1、消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套,再用消毒水對(duì)無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。
2、接種
。1)在無菌操作臺(tái)酒精燈旁打開用儲(chǔ)物袋密封保存的病料,先左手持鑷子右
手持剪刀,把病料剪出一個(gè)小口。
。2)右手持滅過菌的接種環(huán),左手持平板,并用拇指、食指及中指將平皿揭
開約20左右,然后將接種環(huán)前端插入小口旋轉(zhuǎn)一下后,再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板上。
。3)用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標(biāo)記,并將平板倒放。
以此方法,分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上,各接種2個(gè)血清平板。
3、培養(yǎng):將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中,反向培養(yǎng)24小時(shí)。注:劃線接種時(shí)盡量劃開,以保證長(zhǎng)出單個(gè)菌落,且劃線時(shí)接種環(huán)應(yīng)盡量?jī)A斜,以免劃破培養(yǎng)基(后同);待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈,關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口,打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。 。
。ㄋ模┘(xì)菌純培養(yǎng)
1、菌落特征判斷
待粗培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)24小時(shí)后,取出用放大鏡觀察記錄單個(gè)小菌落的形態(tài)特征并用實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙記錄好,并在平板底部上做好觀察標(biāo)記,其形態(tài)特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構(gòu)造、隆起度、濕潤(rùn)度、透明度、顏色等。
2、取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢
。1)取干凈的載玻片,用記號(hào)筆在其一面做好正反面標(biāo)記,再在載玻片另一
面中央滴上一小滴蒸餾水。
(2)將接種環(huán)在火焰上滅菌,待冷卻后,在酒精燈旁從標(biāo)記的單個(gè)小菌落中
取少許細(xì)菌置于蒸餾水中混勻(同時(shí)蓋好平板倒扣置于一旁),用接種環(huán)涂成直徑約1.5cm的菌膜,再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細(xì)菌,待冷卻進(jìn)行染色。
。3)先滴加草酸結(jié)晶紫溶液染色1~2min,再水洗;然后滴加革蘭氏碘液溶液
染色1~2min,再水洗;隨后滴加95%的酒精脫色30~60s,再水洗;最后滴加稀釋的品紅進(jìn)行復(fù)染30~60s,再水洗;待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。
。4)將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下,滴加一滴松柏油進(jìn)行鏡檢,觀察其
形態(tài)特征,判斷細(xì)菌的種屬。
3、細(xì)菌接種培養(yǎng)
。1)消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套,再用消毒水對(duì)
無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。
。2)接種:右手持滅過菌的接種環(huán),左手持平板,并用拇指、食指及中指將
平皿揭開約20左右,然后將接種環(huán)插入揭開的平板口內(nèi)蘸去一下鏡檢標(biāo)記的小菌落,再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標(biāo)記,將平板倒放。
。3)將接種好的平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中,反向培養(yǎng)24小時(shí)。
注:油鏡用完后應(yīng)立即清理物鏡上的松柏油;劃線接種時(shí)盡量劃開,以保證長(zhǎng)出單個(gè)菌落;待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈,關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口,打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。 。
。ㄎ澹┚旱闹苽
1、鏡檢:用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢,觀察并記錄是否為純培養(yǎng)的細(xì)菌。
2、分裝液體培養(yǎng)基:先對(duì)無菌操作臺(tái)及需要使用的`器械進(jìn)行消毒滅菌,然后用鉗子揭開一個(gè)空試劑瓶,用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養(yǎng)基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶?jī)?nèi),并立即蓋上液體培養(yǎng)基大試劑瓶瓶塞。
3、接種:右手持接種環(huán),用火焰對(duì)其進(jìn)行滅菌,待冷卻后,取出純培養(yǎng)的平板,在無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈旁,蘸去少許細(xì)菌,左手傾斜液體培養(yǎng)基,將接種環(huán),伸入液體培養(yǎng)基內(nèi)攪動(dòng),然后取出對(duì)接種火焰環(huán)滅菌,并用滅菌的包裝紙捆綁好后,用記號(hào)筆做好相應(yīng)標(biāo)記,置于一旁。
4、培養(yǎng)搖菌:將接種好的液體培養(yǎng)基置于水浴培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。注:分裝一個(gè)培養(yǎng)基就接種一個(gè)培養(yǎng)基,不得全部分裝完后再一個(gè)一個(gè)接種。
。┬∈笾虏⌒詫(shí)驗(yàn)
1、保定:選擇健康的青壯年小白鼠,先用右手抓住尾巴,旋轉(zhuǎn)數(shù)周讓其眩暈,然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚,并翻轉(zhuǎn)左手,使其頭部朝下,以達(dá)到內(nèi)臟前移的目的。
2、接種:先用酒精棉球蘸取酒精對(duì)注射部位擦洗消毒,再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。
3、觀察:將接種的小白鼠放在適宜的環(huán)境下生活,并在鼠籠處用記號(hào)筆標(biāo)記好接種時(shí)間、菌種等。
4、再培養(yǎng)鑒定:待小白鼠死亡后,對(duì)其進(jìn)行解剖,觀察其內(nèi)臟病變情況,并取肝臟直接涂在相應(yīng)培養(yǎng)基上,在適宜條件下反向培養(yǎng)24小時(shí)后,取菌落細(xì)菌進(jìn)行鏡檢觀察判斷。
注:在注射小白鼠2小時(shí)候需要觀察小白鼠是否因注射時(shí)傷害到內(nèi)臟而死亡。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告2
【探究?jī)?nèi)容】
探究種子萌發(fā)的環(huán)境條件
【探究目的】
1、了解種子萌發(fā)需要的環(huán)境條件。
。病W(xué)會(huì)進(jìn)行探究實(shí)驗(yàn)的一般方法。
【探究器材】
種子100粒、5個(gè)能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個(gè)、餐巾紙10張、標(biāo)簽紙5張
【探究過程】
提出問題:光的強(qiáng)弱會(huì)對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?水的多少會(huì)對(duì)種子的萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?溫度的高低會(huì)對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?空氣的流通會(huì)對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?
做出假設(shè):光的'強(qiáng)弱、水的多少、溫度的高低都會(huì)對(duì)種子的萌發(fā)產(chǎn)生一定的影響。
制定計(jì)劃:準(zhǔn)備100顆綠豆種子,5個(gè)有蓋的瓶子,10張紙巾,5張便利貼。1號(hào)瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,放在空氣流通,有陽光的地方;2號(hào)瓶的水不但能濕透紙巾,而且能把種子淹沒,放在空氣流通,有陽光的地方;3號(hào)瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,用蓋子把瓶子蓋上,使瓶子空氣不能流通;4號(hào)瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒種子,放在冰箱里,盡量使瓶子里的水不結(jié)冰;5號(hào)瓶不放水,放在空氣流通,有陽光的地方。
實(shí)施計(jì)劃:每天都進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并觀察5個(gè)瓶子有什么變化,再把每天的變化都紀(jì)錄下來。
分析結(jié)果:1號(hào)瓶大部分能發(fā)芽;2號(hào)瓶的種子皮破了,但不能發(fā)芽;3號(hào)瓶只有少許發(fā)了芽;4號(hào)瓶和5號(hào)瓶沒有發(fā)芽
得出結(jié)論:想要種子發(fā)芽,一定要有適宜的光度;需要適量的水分,溫度也要控制好,空氣的流通也有一定的影響,但影響沒有光度、水分和溫度大,相對(duì)來說,空氣流通的影響較小。
這個(gè)實(shí)驗(yàn)很簡(jiǎn)單,我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)要分以上幾步完成,就會(huì)很容易的完成實(shí)驗(yàn)。
【交流與評(píng)估】
1、根據(jù)你的問題和假設(shè),應(yīng)當(dāng)將種子分成幾組?XX每組應(yīng)有多少粒種子?XX每組只有一粒種子可以嗎?
2、對(duì)照組應(yīng)提供的溫度、水分、空氣等條件應(yīng)該如何?
3、每個(gè)實(shí)驗(yàn)組的處理,除了所研究的條件外,其他環(huán)境條件是否應(yīng)與對(duì)照組相同?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告3
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分會(huì)通過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液,導(dǎo)致細(xì)胞壁和原生質(zhì)層收縮。由于原生質(zhì)層的收縮性較大,隨著細(xì)胞不斷失水,原生質(zhì)層逐漸與細(xì)胞壁分離,形成質(zhì)壁分離。當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分透過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液,使原生質(zhì)層逐漸恢復(fù)原狀,植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離的.復(fù)原過程。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書p60)
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1. 如果把洋蔥表皮細(xì)胞浸泡在與細(xì)胞液等滲的蔗糖溶液中,這些細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。
2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.繪制一組模式圖,描述一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下,經(jīng)過處理后的變化。首先將細(xì)胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理,然后再經(jīng)過清水處理。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告4
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)會(huì)如何使用顯微鏡觀察細(xì)胞;
2、了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu);
3、學(xué)會(huì)制作臨時(shí)裝片。
二、實(shí)驗(yàn)材料:(實(shí)驗(yàn)材料可換)松針、動(dòng)物血液、動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞永久裝片
三、實(shí)驗(yàn)用具: 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、10X、40X)
四、方法步驟:
1、制作松針的臨時(shí)切片:
。1)取干凈的載玻片一個(gè)平置于試驗(yàn)臺(tái)上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。
(2)將土豆切成條狀(截面約:0.5X0.5cm)取兩條,將一根松針夾在兩個(gè)土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時(shí),手腕不動(dòng),靠大臂帶動(dòng)小臂移動(dòng)刀片。切片數(shù)次。從中選取較薄的切片,置于載玻片的水滴上。
。3)從一側(cè)輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴,即完成臨時(shí)切片的'制作。
2、觀察切片:
。1)取出顯微鏡,置于試驗(yàn)臺(tái)上靠左的位置,打開光源。
。2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺(tái)上,調(diào)整載物臺(tái)位置,使蓋玻片對(duì)準(zhǔn)光源。
(3)使用5X物鏡觀察切片,使松針切片在視野中心,換成10X物鏡,觀察松針葉面橫切結(jié)構(gòu)。
。4)換成40X物鏡觀察,注意細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)結(jié)構(gòu),畫圖。
3、動(dòng)物血液臨時(shí)裝片的制作及觀察(除了不用切片,其他類似)
4、 動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞永久裝片的觀察。
五、反思:
1、松針的葉面結(jié)構(gòu)是什么樣的?
2、動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)是什么樣的?與植物細(xì)胞又什么不同?
3、顯微鏡的物鏡倍數(shù)愈大,視野的亮度如何?物體的大小如何?
4、如何調(diào)節(jié)焦距?
5、如何才能使切片盡量的?切片的厚薄對(duì)顯微鏡下觀察的效果有什么影響。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期。
2、初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。
3、初步掌握繪制生物圖的方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
在植物體中,有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞,高等植物細(xì)胞有絲分裂的過
程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍顯微鏡觀察植物細(xì)胞的
有絲分裂的過程,根據(jù)各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識(shí)別該細(xì)胞處于有
絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色。
三、材料用具
洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養(yǎng)皿、鉛筆、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的'鹽酸、
體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P39)
1、洋蔥根尖的培養(yǎng)(提前3—4天)
2、解離:5min
3、漂洗:10min
4、染色:5min
5、制片
6、鏡檢
五、注意
1、解離充分是實(shí)驗(yàn)成功的必備條件。解離充分,組織才能分散,細(xì)胞也不會(huì)重疊。
2、漂洗時(shí)間一定要足夠,否則細(xì)胞染不上色。
3、染色時(shí),染液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好。特別是染色不能過深,否則鏡下一片紫色,無法觀察。
六、討論
1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?談?wù)勀阕约旱捏w會(huì)。
2、在觀察清楚有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞以后,繪出洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的簡(jiǎn)圖,并標(biāo)明時(shí)期。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告6
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞:顯微鏡、洋蔥表皮細(xì)胞切片,及其他細(xì)胞裝片。
一、目的:在實(shí)驗(yàn)過程中為學(xué)生提供多種細(xì)胞裝片,以供學(xué)生操作、觀察,增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗(yàn)的時(shí)間,使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)歷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距的過程,從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
二、步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。
2、對(duì)光:轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。
3、調(diào)節(jié)載物臺(tái)下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見亮的光圈。
4、觀察:調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,把所要觀察的.洋蔥表皮切片放在載物臺(tái)上,用壓片夾夾住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋等,直到看清切片上的細(xì)胞為止,最后整理器材。
三、注意事項(xiàng):
1、取送顯微鏡時(shí),應(yīng)右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時(shí),坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙畫圖。兩眼須同時(shí)睜開。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標(biāo)本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時(shí),切勿使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓壞標(biāo)本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開鏡頭后再取出玻片標(biāo)本,以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告7
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
了解細(xì)胞膜[1]的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度[2]
二、實(shí)驗(yàn)原理
1、在等滲溶液中,細(xì)胞對(duì)各種溶質(zhì)的透過性不同。有的溶質(zhì)可以進(jìn)入,有的溶質(zhì)不能滲入。
2、滲入的溶質(zhì)能提高細(xì)胞的滲透壓,促進(jìn)水分子進(jìn)入細(xì)胞,引起溶血現(xiàn)象[3]。
3、不同的溶質(zhì)滲入到細(xì)胞內(nèi)的速度不同,因此溶血時(shí)間也不同。
三、實(shí)驗(yàn)材料
新鮮血液(雞血、豬血、牛血等)
四、實(shí)驗(yàn)器材
試管(1.5cmX18cm)、試管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml燒杯(2個(gè))、250ml容量瓶、移液槍、膠頭滴管、菜刀、吸球、電子天平、顯微鏡、蓋玻片、載玻片、秒表
五、實(shí)驗(yàn)藥品及試劑
0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸銨、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝劑[4]
六、實(shí)驗(yàn)步驟
1、制備血液稀釋液
(1)抗凝劑的制備:首先稱取1克肝素鈉粉末,然后加入0.17MNaCl溶液10ml(1∶10的比例),混合均勻,制成肝素抗凝劑。
。2)血液稀釋液的制備:取新鮮血液,按比例(肝素抗凝劑:血液=1∶10)混合均勻,配制成經(jīng)肝素抗凝的血液[5][6]。
。3)按比例(經(jīng)肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10)混合均勻,形成一種不透明的紅色液體[7]。
2、低滲溶液(空白對(duì)照)的觀察
取試管一只,加入10ml蒸餾水,然后再加入1ml稀釋的血液。注意觀察溶液顏色的`變化。結(jié)果是溶液由不透明的紅色變?yōu)槌吻。記錄下這個(gè)過程所要的時(shí)間。
3、紅血球的滲透性
按表一的配制,分別在下列十種等滲溶液中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。輕輕搖動(dòng),注意有無顏色變化,是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生,記下時(shí)間(自加入稀釋血液到溶液逐漸由紅色變?yōu)橥该鞒吻,紅血球全部溶血所需時(shí)間),填入表一的空格中。
4、顯微觀察
[1]何為細(xì)胞膜?[5]注意:這一步,動(dòng)作要非常迅速,否則雞血會(huì)凝固;蛘呦劝芽鼓齽┘尤氲綗,再加入新鮮的[2]雞血,邊加邊震蕩即可。為何不同物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度不同?[6]為什么新鮮的雞血會(huì)凝固?[3]何為溶血現(xiàn)象?[7]為什么這一步要使用0.17M的NaCl溶液?[4]你知道有哪些血液抗凝劑?
(1)血液紅細(xì)胞的觀察
滴一滴稀釋的血液于載玻片上,蓋上蓋玻片。用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞的種類、形狀和顏色。
(2)細(xì)胞破碎的觀察
在上一步的載玻片的一端滴加清水,在另一端吸水,并在顯微鏡下觀察細(xì)胞的破裂。
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
1、比較和分析你所觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并解釋原因。
結(jié)果:
(1)在所提供的試劑中不溶血的有:
。2)在所提供的試劑中不完全溶血的有:
(3)在所提供的試劑中完全溶血的有:
結(jié)果分析與比較:結(jié)論:
2、繪制你所觀察到的血液細(xì)胞圖。
3、討論溶血實(shí)驗(yàn)在研究中應(yīng)用的可能性。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告8
實(shí)驗(yàn)名稱:
觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)習(xí)制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本。
2、學(xué)會(huì)使用顯微鏡觀察洋蔥表皮,用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細(xì)胞。
3、對(duì)比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗(yàn)重點(diǎn):
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)難點(diǎn):
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
分組實(shí)驗(yàn)器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗(yàn)過程:
一、導(dǎo)入課題
出示洋蔥。問:如果從它的內(nèi)表皮上揭下一塊,用顯微鏡來觀察能看到些什么呢?(板書課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本的方法與步驟。
。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內(nèi)壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內(nèi)表皮放到載玻片的水滴中央,注意標(biāo)本要平展開,不能折疊;
。3)用蓋玻片傾斜著蓋到標(biāo)本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過多,可用吸水紙吸掉;
。4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
。5)洋蔥表皮玻片標(biāo)本做成可進(jìn)行觀察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標(biāo)本(最好制三份裝片,便于下面的對(duì)比觀察),教師巡視指導(dǎo)(教育學(xué)生注意安全)。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
。1)、出示顯微鏡,引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識(shí)顯微鏡,簡(jiǎn)介各部分的名稱、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
。2)、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。(師操作演示:安放――對(duì)光――上片――調(diào)焦――觀察。生一步步跟著操作。)
。3)、學(xué)生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細(xì)胞。教師巡視指導(dǎo),各組的實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)監(jiān)督組員操作是否規(guī)范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀察,并將觀察結(jié)果進(jìn)行交流。組長(zhǎng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)畫到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)。
(1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現(xiàn)。
。2)各組將所畫的觀察結(jié)果向全班展示。
。3)交流討論評(píng)價(jià)。
6、師小結(jié):我們發(fā)現(xiàn)放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的.細(xì)節(jié)更多,更清楚。我們發(fā)現(xiàn)洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規(guī)則的多邊形組成的,而且大多呈長(zhǎng)方形,外為細(xì)胞壁,內(nèi)為無色細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結(jié)構(gòu),就是洋蔥的細(xì)胞。(師一邊描述一邊畫洋蔥細(xì)胞簡(jiǎn)圖)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材,整理實(shí)驗(yàn)桌。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告9
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測(cè)
姓名:XXX學(xué)號(hào):2011001400XX年級(jí):20xx級(jí)生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。
3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗(yàn)原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒(Plasmid)是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細(xì)菌、放線菌、真菌以及一些動(dòng)植物細(xì)胞中,但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群,在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟:①培養(yǎng)細(xì)菌,使質(zhì)粒DNA大量擴(kuò)增;②收集和裂解細(xì)菌;③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細(xì)菌細(xì)胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來,但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達(dá)12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性;共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊(cè)谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA可恢復(fù)原來的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復(fù)性,而是與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心,與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類似,乙醇沉淀
DNA的同時(shí),也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異,就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測(cè)到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的`的實(shí)驗(yàn)。
分子生物學(xué)中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長(zhǎng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(zhǎng)鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對(duì)分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測(cè)定DNA的相對(duì)分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗(yàn)材料】
1、實(shí)驗(yàn)儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號(hào)槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號(hào)筆、手套等。
2、實(shí)驗(yàn)試劑
LB培養(yǎng)基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預(yù)冷無水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)
配制LB液體培養(yǎng)基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養(yǎng)基;準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個(gè) ,將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過夜培養(yǎng),培養(yǎng)基中加Ap100ul
(100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(zhǎng)。 過夜培養(yǎng)后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mlLB液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期,生長(zhǎng)速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
。1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒?jié)M,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細(xì)胞。
。2)向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質(zhì)量為106mg。
(3)洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會(huì)快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細(xì)胞提前破裂,防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長(zhǎng)。Tris—Cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒H。
。4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對(duì)應(yīng)),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結(jié)構(gòu)向micelle(微囊)結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時(shí),強(qiáng)堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
。5)按比例加入冰預(yù)冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ?qū)?yīng)),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的堿性條件會(huì)打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
。6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側(cè),用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng),對(duì)DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當(dāng)加入乙醇時(shí),乙醇會(huì)奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負(fù)電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
(8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。
(9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩(wěn)定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護(hù)堿基對(duì)。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
(1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
。2)將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。
。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì)影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會(huì)損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫,有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。
(4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
(5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
。6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。
(8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測(cè)
。1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標(biāo)好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補(bǔ)充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
。2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
。3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍(lán)色)的移動(dòng)。
(4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色,完全浸泡約5min。
(5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項(xiàng)】
。1)滴加溶液II時(shí),要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動(dòng)作要快,因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時(shí)間不能過長(zhǎng),否則會(huì)破壞質(zhì)粒DNA。
。2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應(yīng)該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告10
實(shí)驗(yàn)生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中,用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過程為:淺藍(lán)色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的`成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ 染成紅色
三、實(shí)驗(yàn)過程(見書P18)
四、實(shí)驗(yàn)用品(見書P18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn),在加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告11
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步學(xué)會(huì)探索酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學(xué)反應(yīng)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們?cè)诿傅拇呋饔孟露寄芩獬蛇原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成磚紅色的'氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應(yīng)。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計(jì)、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實(shí)驗(yàn)過程
。ㄒ姇47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
。.兩支試管保溫時(shí),為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?
3.如果2號(hào)試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告12
實(shí)驗(yàn)一觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布
實(shí)驗(yàn)原理:DNA綠色,RNA紅色
分布:真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色。
實(shí)驗(yàn)二物質(zhì)鑒定
還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀
脂肪+蘇丹III橘黃色
脂肪+蘇丹IV紅色
蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色反應(yīng)
1、還原糖的檢測(cè)
(1)材料的選。哼原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍(lán)色→磚紅色)
★模擬尿糖的檢測(cè)
1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、檢測(cè)方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙
3、結(jié)果:(用斐林試劑檢測(cè))試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞原糖,與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發(fā)生反應(yīng)。
2、脂肪的檢測(cè)
(1)材料的選。汉玖吭礁叩慕M織越好,如花生的子葉。
(2)步驟:制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)
鏡檢鑒定(顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
考點(diǎn)提示:
(1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
(2)還原性糖植物組織取材條件?
含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。
(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響?
加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。
(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用?
混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。
(5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序?yàn)椋簻\藍(lán)色棕色磚紅色
(6)花生種子切片為何要薄?只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。
(7)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí),若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?切片的厚薄不均勻。
(8)脂肪鑒定中乙醇作用?洗去浮色。
(9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的。怎樣通過對(duì)比看顏色變化?
不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對(duì)比。
實(shí)驗(yàn)三觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片
2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無色。
知識(shí)概要:
取材制片低倍觀察高倍觀察
考點(diǎn)提示:
(1)為什么可直接取用蘚類的小葉,而不能直接取用菠菜葉?
因?yàn)樘\類的小葉很薄,只有一層細(xì)胞組成,而菠菜葉由很多層細(xì)胞構(gòu)成。
(2)取用菠菜葉的下表皮時(shí),為何要稍帶些葉肉?
表皮細(xì)胞除保衛(wèi)細(xì)胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細(xì)胞含較多的葉綠體。
(3)怎樣加快黑藻細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度?最適溫度是多少?進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。
(4)對(duì)黑藻什么部位的細(xì)胞觀察,所觀察到的細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的現(xiàn)象最明顯?葉脈附近的細(xì)胞。
(5)若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)方向?yàn)轫槙r(shí)針,則在裝片中該細(xì)胞的.細(xì)胞質(zhì)的實(shí)際流動(dòng)方向是怎樣的?仍為順時(shí)針。
(6)是否一般細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不流動(dòng),只有黑藻等少數(shù)植物的細(xì)胞質(zhì)才流動(dòng)?
否,活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)都是流動(dòng)的。
(7)若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),則對(duì)顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)?
視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些,可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。
(8)在強(qiáng)光照射下,葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源實(shí)驗(yàn)四觀察有絲分裂。
1、材料:洋蔥根尖(蔥,蒜)
2、步驟:
(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)
(二)裝片的制作
制作流程:解離→漂洗→染色→制片
1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液)。時(shí)間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來。
2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色。
3.染色:用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min。目的:使染色體著色,利于觀察。
4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后用拇指輕輕地按壓載玻片。目的:使細(xì)胞分散開來,有利于觀察。
(三)觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。
2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn))。其中,處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。
考點(diǎn)提示:
(1)培養(yǎng)根尖時(shí),為何要經(jīng)常換水?增加水中的氧氣,防止根進(jìn)行無氧呼吸造成根的腐爛。
(2)培養(yǎng)根尖時(shí),應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?應(yīng)選用舊洋蔥,因?yàn)樾卵笫[尚在休眠,不易生根。
(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的時(shí)間是何時(shí)?為何?
因?yàn)楦夥稚鷧^(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂;上午10時(shí)到下午2時(shí);因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞分裂活躍。
(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時(shí)為何要再加一塊載玻片?解離是為了使細(xì)胞相互分離開來,壓片是為了使細(xì)胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。
(5)若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?壓片時(shí)用力過大。
(6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?分解和溶解細(xì)胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替。
(7)為何要漂洗?洗去鹽酸便于染色。
(8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么?染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。
(9)若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色,其原因是什么?
染液濃度過大或染色時(shí)間過長(zhǎng)。
(10)為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點(diǎn)是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么?
因?yàn)樵诟庵挥蟹稚鷧^(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂;分生區(qū)的特點(diǎn)是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因?yàn)楦弑剁R所觀察的實(shí)際范圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。
(11)分生區(qū)細(xì)胞中,什么時(shí)期的細(xì)胞最多?為什么?間期;因?yàn)樵诩?xì)胞周期中,間期時(shí)間最長(zhǎng)。
(12)所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎?為什么?
不能,因?yàn)樗^察的細(xì)胞都是停留在某一時(shí)期的死細(xì)胞。
(13)觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體?為什么?不能,因?yàn)檠笫[表皮細(xì)胞一般不分裂。
(14)若觀察時(shí)不能看到染色體,其原因是什么?
沒有找到分生區(qū)細(xì)胞;沒有找到處于分裂期的細(xì)胞;染液過稀;染色時(shí)間過短。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告13
實(shí)驗(yàn)名稱:
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的.光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P30)
1.制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4.用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對(duì)于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4.用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告14
實(shí)驗(yàn)日期: 年月 日
組長(zhǎng): 組員:
一、實(shí)驗(yàn)要求
1、練習(xí)使用顯微鏡,學(xué)習(xí)規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)⒉F瑯?biāo)本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖像。
二、實(shí)驗(yàn)原理
三、材料用具
顯微鏡,寫有“上”字的玻片,動(dòng)物、植物玻片標(biāo)本,擦鏡紙,紗布。
四、方法與步驟
。ㄒ唬┤$R和安放
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
。ǘ⿲(duì)光
3、轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持2厘米的距離)。
4、把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開,便于以后同時(shí)畫圖)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡,以看到白亮的'視野。
(三)觀察
5、把所要觀察的玻片標(biāo)本(也可以用印有“e”字的薄紙片制成)放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。
6、轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標(biāo)本)。
7、左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,把兩個(gè)物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告15
為了加強(qiáng)我院醫(yī)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理工作,確保實(shí)現(xiàn)醫(yī)院的安全目標(biāo),我院檢驗(yàn)科根據(jù)xxxx省《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)規(guī)定,對(duì)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室的安全管理工作進(jìn)行了自查。我們還針對(duì)涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進(jìn)行了培訓(xùn),提高他們的生物安全意識(shí),并確保他們掌握必要的生物安全知識(shí)。
一、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作、各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況
醫(yī)院檢驗(yàn)科注重學(xué)習(xí)和遵守《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》,并定期對(duì)生物安全各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查和整改。實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格遵守國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程,并指派專人監(jiān)督檢查其落實(shí)情況。同時(shí),詳細(xì)記錄檢查情況,并定期召開會(huì)議討論發(fā)現(xiàn)的問題,并及時(shí)糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運(yùn)輸
由于目前我院的相關(guān)條件存在限制,暫時(shí)無法開展病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物的檢查。為了滿足通知要求,我們積極組織相關(guān)人員學(xué)習(xí)了以下內(nèi)容:嚴(yán)格管理病原微生物實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種的登記制度,一旦收到菌(毒)種后立即進(jìn)行編號(hào)登記,并詳細(xì)記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號(hào)、傳代日期和數(shù)量。在菌(毒)種的管理過程中,包括安全保衛(wèi)制度、安全保衛(wèi)措施和保管過程中的傳代、分發(fā)和使用,都需要及時(shí)進(jìn)行登記,同時(shí)定期核對(duì)庫(kù)存數(shù)量。在銷毀菌(毒)種時(shí),還需進(jìn)行滅菌指示標(biāo)志和滅菌效果的登記,并做好銷毀過程的記錄。
三、實(shí)驗(yàn)室生物安全突發(fā)事件的處理工作
在本次自我檢查中,我們實(shí)驗(yàn)室對(duì)之前制定的應(yīng)急指揮和處置體系進(jìn)行了修訂,以更好地滿足實(shí)際工作的需求。
當(dāng)遭遇自然災(zāi)害(例如地震、水災(zāi)等)或設(shè)施故障時(shí),我們制定了針對(duì)可能出現(xiàn)的緊急情況的處理原則和應(yīng)對(duì)措施。
同時(shí)規(guī)范了菌(毒)種外溢在臺(tái)面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷(破損)的.處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報(bào)告制度。
我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室的醒目位置貼出了一份聯(lián)系電話列表,方便大家隨時(shí)獲取相關(guān)部門的聯(lián)系方式。這份列表包括實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人、實(shí)驗(yàn)室工作人員、消防部門、醫(yī)院、公安機(jī)關(guān)、工程技術(shù)人員、以及水、電氣維修部門的電話號(hào)碼。
四、提高意識(shí),加強(qiáng)學(xué)習(xí)
組織檢驗(yàn)人員對(duì)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí),同時(shí)加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)入制度的管理,標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室類型、負(fù)責(zé)人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強(qiáng)了個(gè)人安全防護(hù)。
經(jīng)過此次對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作的自查,我們?nèi)w檢驗(yàn)人員對(duì)該工作的重要性有了更深刻的認(rèn)識(shí)。為加強(qiáng)管理,確保實(shí)驗(yàn)室工作的安全,我們采取了有效措施。
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