空氣環(huán)境微生物檢測報告

　　摘要：

　　空氣是人類賴以生存的必須環(huán)境，也是微生物借以擴散的媒介�？諝庵写嬖谥�細(xì)菌、真菌、病毒、放線菌等多種微生物粒子，這些微生物粒子是空氣污染物的重要組成部分。而實驗室中的環(huán)境是更為重要的，對微生物的要求更加的高，一個好的實驗室環(huán)境可以讓實驗結(jié)果更加的精確。本實驗通過對實驗室空氣的采集，對微生物的培養(yǎng)及染色觀察來證明證明實驗室環(huán)境存在微生物，也證明無菌操作的重要性。

　　正文：

　　前言

　　實驗室空氣微生物含量多少可以反映該實驗室的空氣質(zhì)量，需要測定空氣中的微生物數(shù)量和空氣污染微生物。實驗室的空氣中微生物越少，代表在該實驗室做微生物實驗的時候誤差會小，成功率會高。本實驗以牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)實驗室中的微生物，利用革蘭氏染色法及顯微鏡觀察實驗室中空氣中的微生物種類及形態(tài)。

　　1.材料方法

　　1.1實驗材料

　　1.1.1樣品來源

　　實驗室空氣

　　1.1.2藥品

　　氫氧化鈉（固體），牛肉膏，蛋白胨，瓊脂粉，Nacl。

　　1.1.3耗材

　　培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基）無菌水，石棉網(wǎng)，電爐，酒精燈，培養(yǎng)皿，三角瓶，500ml燒杯，玻璃棒，超凈工作臺，Ph試紙。

　　1.2方法

　　1.2.1取樣

　　采集實驗室空氣樣本

　　1.2.2制作培養(yǎng)基

　　在500ml燒杯內(nèi)加水200毫升，放入牛肉膏1.0g、蛋白胨2.0g和氯化鈉1.0g，做記號，放在火上加熱，待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂4.0g，不斷攪拌以免粘底。停止加熱后冷卻，加入配置的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值至7.2-7.5后倒入三角瓶。

　　1.2.3高壓滅菌

　　將培養(yǎng)皿和三角瓶用報紙及繩包裝后，利用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)皿和裝有培養(yǎng)液的三角瓶高壓滅菌，121度維持20分鐘.

　　1.2.4分裝培養(yǎng)液及加入樣本

　　在超凈工作臺上將三角瓶中的培養(yǎng)液分裝到6個培養(yǎng)皿當(dāng)中，等培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液冷卻凝固，將其中三個加入實驗室中的空氣樣本，二個加入超凈工作臺空氣，一個作為對照組。對照組A，實驗組B貼標(biāo)簽做記號，倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　1.2.5革蘭氏染色，觀察其種類，形態(tài)

　　將培養(yǎng)好的帶有微生物菌落的培養(yǎng)基拿出，取干凈的載玻片于實驗臺上，在載玻片中央滴一滴無菌蒸餾水，將接種環(huán)在火焰上燒紅，待冷卻后從斜面挑取少量菌種與玻片上的水滴混勻后，在載玻片上涂布成一均勻的薄層，涂布面不宜過大。利用高溫，手持載玻片的一端，標(biāo)本向上，在酒精燈火焰外層盡快的來回通過2~3次，共約2~3秒鐘，放置待冷后，進(jìn)行染色。初染：用結(jié)晶紫染色1m(轉(zhuǎn)載于:www.hnNscy.CoM:空氣微生物)in后水洗，吸干。媒染：加碘液1min后水洗，吸干。脫色：用脫色液（95%乙醇）脫色30s，水洗，吸干。復(fù)染：用番紅復(fù)染3min，水洗，吸干。待標(biāo)本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物后用油鏡觀察，注意細(xì)菌細(xì)胞的顏色。

　　2.結(jié)果與分析

　　2.1實驗結(jié)果

　　2.2分析

　　此次實驗實驗?zāi)康幕�本完成，但仍存在一些誤差。本實驗采取1個培養(yǎng)基無菌作為對照組，另外5個作為實驗組，3個采用實驗室空氣，2個采用超凈工作臺空氣（1）5個實驗組中，有一個培養(yǎng)皿沒有生長出細(xì)菌，由于倒培養(yǎng)基操作時培養(yǎng)液傾倒過少，導(dǎo)致無法滿足細(xì)菌生長代謝繁殖的所需能量。（2）如圖四，是培養(yǎng)皿中長出的細(xì)菌，經(jīng)查詢，此細(xì)菌為呼吸道內(nèi)的雜菌，由于操作時操作者不慎咳嗽將菌注入培養(yǎng)皿中。（3）如圖6使用革蘭氏染色法，但鏡下觀察有重疊現(xiàn)象，制片時為徹底打散細(xì)菌。

　　3.討論

　　本實驗除了略微操作失誤以外，其他良好，經(jīng)討論，我們認(rèn)為無菌操作時十分重要的，本實驗操作簡單，步驟清晰，答題沒有改動的地方，但在其中一個操作過程中，把培養(yǎng)皿直接放在教室中和超凈工作臺上是不可取的，導(dǎo)致上述分析中的

　�。�2）失誤。我們應(yīng)該更加注重?zé)o菌操作。

　　3.參考文獻(xiàn)

　　[1]．《公共場所空氣的微生物檢測報告》孫艷萍

　　[2].《圖書館內(nèi)外空氣微生物檢測及資源保護》王伯秋

　　[3].《基礎(chǔ)生物學(xué)實驗技術(shù)》主編：陳永富哈爾濱工程大學(xué)出版社2009